新型mRNA疫苗！曾木圣团队发文：揭示EBV相关恶性肿瘤治疗新策略

10月27日，中山大学曾木圣研究团队在期刊《ADVANCED SCIENCE》上在线发表题为“mRNA-based Vaccines Targeting the T-cell Epitope-rich Domain of Epstein Barr Virus Latent Proteins Elicit Robust Anti-Tumor Immunity in Mice”的研究论文，研究结果表明，本研究开发的基于mRNA的EBV治疗疫苗为治疗EBV相关恶性肿瘤提供了一种有前景的新策略。然而，还需要进一步研究来评估它们在临床试验中的安全性和疗效，并优化其设计以增强其治疗潜力。

研究背景

EBV是人类一个被鉴定为致癌病毒的病毒，已感染全球超过90%的人口。EBV主要感染上皮细胞和B细胞，约占人类恶性肿瘤的约2%。EBV的持续存在是由于其能够在宿主细胞中建立潜伏感染并逃避免疫识别的能力。通常，EBV感染发生在儿童期，并且通常没有症状。随后，EBV可以在宿主细胞中建立潜伏感染并逃避免疫识别，通常可以持续宿主的一生。

EBNA1在EBV相关肿瘤中持续表达，并且对于维持和复制EBV基因组至关重要，而EBNA3A在EBV诱导的淋巴瘤中上调表达，并且可以在体外诱导出强效的抗EBV特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTLs）。此外，与健康人的对照淋巴细胞相比，EBV诱导的淋巴瘤细胞的LMP2A、EBNA1和EBNA3A的mRNA水平分别增加了38倍、1157倍和1154倍。因此，这些EBV潜伏蛋白是有希望用于治疗疫苗的候选物。

基于mRNA的疫苗由于其能够诱导安全、有效和持久的免疫反应，近期已经成为癌症疫苗开发的一种有前途的技术。这些疫苗可以有效地引发细胞和体液免疫反应，并且它们不会产生显著的抗载体免疫力，这使得可以进行重复的接种。此外，mRNA疫苗不含有DNA，消除了基因组整合的风险。它们的良好安全性得以证明，因为在冠状病毒疾病的mRNA疫苗中观察到，它们无法整合到宿主基因组中或重新激活潜伏病毒。此外，mRNA可以在体内直接表达，这使得它成为难以在体外纯化的抗原的有吸引力的替代品。

研究发现

本研究开发并测试了三种mRNA疫苗，分别编码EBV潜在蛋白的T细胞表位丰富区域，包括Trunc-LMP2A、Trunc-EBNA1和Trunc-EBNA3A。这些疫苗在小鼠中有效激活细胞和体液免疫，并在抑制肿瘤进展和改善携带肿瘤小鼠的生存时间方面显示出有希望的结果。此外，观察到截断形式的抗原Trunc-LMP2A、Trunc-EBNA1和Trunc-EBNA3A比全长抗原更有效地激活特异性抗原免疫反应。综上所述，研究结果表明基于mRNA的治疗性疫苗对EBV潜伏蛋白的T细胞表位丰富区域具有有效性，并为EBV相关癌症提供了新的治疗选择。

Trunc-LMP2A-RNP在携带

肿瘤的小鼠中提供了更优越的保护

我们进一步研究了Trunc-LMP2A-RNP的抗肿瘤效果是否与更强的T细胞免疫相关。首先，我们将2×105表达全长LMP2A的B16细胞接种到C57BL/6小鼠体内，然后通过静脉注射给予RNP疫苗。根据第23天的生物发光信号，与无关对照组相比，Trunc-LMP2A-RNP和FL-LMP2A-RNP在抑制肿瘤进展方面表现出类似的效果。然而，接受Trunc-LMP2A-RNP处理的小鼠的存活时间显著长于接受FL-LMP2A-RNP处理的小鼠。这表明Trunc-LMP2A-RNP在携带肿瘤的小鼠中提供了比FL-LMP2A-RNP更好的保护。

此外，我们使用皮下肿瘤模型，在BALB/c小鼠体内皮下接种过表达LMP2A的1×105 4T1细胞。Trunc-LMP2A-RNP和FL-LMP2A-RNP对肿瘤进展的抑制作用明显强于无关-RNP组。在第28天，无关-RNP组中约85%的小鼠死亡。而FL-LMP2A-RNP组有一只小鼠在第28天死亡，而Trunc-LMP2A-RNP组没发生死亡。

研究结果

综上所述，本研究开发的基于mRNA的EBV治疗疫苗为治疗EBV相关恶性肿瘤提供了一种有前景的新策略。然而，还需要进一步研究来评估它们在临床试验中的安全性和疗效，并优化其设计以增强其治疗潜力。