福建医科大学：开辟非小细胞肺癌治疗新途径

4月23日，福建医科大学研究团队在期刊《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》上发表了题为“Tumor-suppressive miR-4732-3p is sorted into fucosylated exosome by hnRNPK to avoid the inhibition of lung cancer progression”的研究论文，本研究为非小细胞肺癌提供了一个有前景的生物标志物，并通过靶向hnRNPK阻止miR-4732-3p从非小细胞肺癌细胞中“外泌体逃逸”，为非小细胞肺癌治疗开辟了一条新的途径。

研究背景

肺癌是常见的恶性肿瘤之一，已成为全球癌症相关死亡的首要原因，其中非小细胞肺癌(NSCLC)约占所有肺癌病例的82%，包括腺癌(LUAD)、鳞状细胞癌(LUSC)和大细胞癌等亚型。TNMⅰ期NSCLC患者的5年生存率高达65%，而TNMⅳ期患者的5年生存率仅为5%。因此，寻找诊断NSCLC的生物标志物和阐明NSCLC进展的机制对改善患者预后至关重要。

外泌体是一种直径为40 ~ 160 nm的特殊类型的细胞外囊泡，含有脂质双层结构。各种类型的细胞分泌的外泌体具有不同的“货物”以获得物质交换和细胞通讯，其中MIRNA在肿瘤来源的外泌体中含量丰富，参与多种恶性肿瘤的发生发展。肿瘤来源的外泌体MIRNA可被癌细胞释放到血清中，为NSCLC的诊断提供了潜在的非侵入性生物标志物，也为NSCLC的治疗提供了有前景的分子靶点。

既往研究发现，肿瘤细胞来源的外泌体中存在某些与肿瘤相关的糖链异常表达，是肿瘤恶性转化的关键标志。岩藻糖基化是常见的糖基化修饰之一，与恶性肿瘤的发生发展密切相关。

研究进展

为了揭示miR-4732-3p在NSCLC细胞中的作用，研究人员采用qRT-PCR方法评估其在SK-MES-1、A549、H460、H226和H1299等几种NSCLC细胞系中的表达。研究人员发现H460和H1299分别表达了较低和较高的miR-4732-3p。为了确定miR-4732-3p对NSCLC细胞行为的影响，研究人员用miR-4732-3p模拟物转染H460细胞使其过表达，而用miR-4732-3p抑制剂转染H1299细胞使其下调。

集落形成和CCK8检测的结果强调了miR-4732-3p在抑制NSCLC细胞增殖中的关键作用。研究人员还进行了鬼笔环肽染色和侵袭实验，以确定miR-4732-3p对NSCLC细胞迁移和侵袭能力的影响。鬼笔环肽染色实验显示，过表达miR-4732-3p的NSCLC细胞变得更圆、更小，而敲低miR-4732-3p的NSCLC细胞表现出明显的形态学变化和更多的丝状足，这已被证明是肿瘤侵袭的关键。侵袭实验结果显示，miR-4732-3p过表达导致迁移和侵袭性H460细胞数量减少，而miR-4732-3p过表达导致迁移和侵袭性H460细胞数量减少，而miR-4732-3p过表达导致迁移和侵袭性H460细胞数量减少。

为了阐明miR-4732-3p抑制NSCLC细胞增殖的潜在机制，研究人员用miR-4732-3p模拟物和miR-NC对H460细胞进行转录组测序，并确定差异表达基因(DEGs)进行后续的基因本体(GO)分析。

为了评估miR-4732-3p在体内的潜在作用，研究人员建立了一个异种移植模型，通过向裸鼠注射稳定过表达miR-4732-3p和miR-NC的H460细胞。研究结果表明，miR-4732-3p显著阻碍了肿瘤生长，证据包括肿瘤重量的显著下降、肿瘤生长速率的降低以及肿瘤内Ki-67表达的降低。与假设一致，对异种移植瘤的蛋白印迹分析进一步证实了稳定过表达miR-4732-3p对G2/M期相关蛋白表达的抑制作用。综上所述，这些结果表明，miR-4732-3p通过诱导体外和体内的G2/M期阻滞抑制了NSCLC进展。

MIR-4732-3P在体外和体内抑制NSCLC增殖

研究结论

总之，这些发现揭示了miR-4732-3p在NSCLC进展中发挥着重要作用。本研究还为非小细胞肺癌提供了一个有前景的生物标志物，并通过靶向hnRNPK阻止miR-4732-3p从非小细胞肺癌细胞中“外泌体逃逸”，为非小细胞肺癌治疗开辟了一条新的途径。