国外学者发文：打破三阴性乳腺癌免疫耐受的治疗靶点

10月28日，以色列魏茨曼科学研究所研究团队在期刊《Cell Reports》上发表了研究论文，题为“CD84 as a therapeutic target for breaking immune tolerance in triple-negative breast cancer”，本研究中，研究人员研究了CD84在三阴性乳腺癌中对TME的调控作用。研究人员证明，CD84在breg中诱导了涉及β-catenin和Tcf4通路的级联反应，后者通过与白细胞介素-10的启动子及其调节因子AhR的启动子结合来诱导白细胞介素-10的转录。这导致了Bregs的扩增，进而控制其他免疫细胞的活性和免疫抑制。因此，研究人员建议将CD84作为打破三阴性乳腺癌免疫耐受的治疗靶点。

背景信息

乳腺癌（BC）是全球女性常见的恶性肿瘤。虽然早期乳腺癌在70%-80%的病例中可以治愈，但晚期转移性乳腺癌缺乏可治愈的治疗方案。BC是由不同亚型组成的异质性疾病。雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2 （HER2）表达阴性的乳腺癌被认为是三阴性乳腺癌（TNBC），是具侵袭性的乳腺癌亚型，占新诊断乳腺癌的15% ~ 20%。由于缺乏独特的细胞表面标志物表达，对这些肿瘤细胞进行靶向治疗极为困难。因此，TNBC对更好的治疗方案的需求尚未得到满足。

TNBC的肿瘤微环境（tumor microenvironment， TME）在塑造疾病的发生、发展中起着重要作用。在肿瘤发生的早期阶段，免疫微环境（ME）发挥抗肿瘤作用，随着疾病的进展和肿瘤的侵袭性，其发展为免疫逃避机制，ME成为促肿瘤作用。TNBC诱导有效的机制降低免疫识别，促进强烈的免疫抑制。在TNBC的TME中，T细胞表现出功能失调的效应状态，其特征是白细胞介素-2 （IL-2）、肿瘤坏死因子（TNF）的分泌减少，以及抑制性受体（也称为耗竭标志物）的高表达。除了“耗竭”T细胞，TME的特征还包括显著存在的调节性T细胞（Tregs）和髓源性抑制细胞（MDSCs），后者是一种未成熟的髓系细胞，能够抑制T细胞、树突状细胞（DCs）和自然杀伤（NK）细胞的抗肿瘤活性。

调节性B细胞（Bregs）是近年来出现的一种免疫抑制细胞群，是BC进展的主要促成因素。breg是具有调节特性的B细胞，通过释放其标志性细胞因子IL-10来发挥其活性。它们响应来自TME的信号而产生，进而通过与TME中的细胞相互作用和与肿瘤细胞直接相互作用促进肿瘤生长。为了开发它们的治疗潜力，了解Bregs的生物学和识别诱导它们分化的信号是必要的。

CD84 正向调节肿瘤微环境中耐受性免疫细胞的积累，从而促进三阴性乳腺癌的进展

在人类样本中CD84的表达提示这种受体在TNBC的ME中发挥作用。因此，研究人员接下来在小鼠模型中研究其在疾病进展中的作用机制。为了确定CD84在小鼠TNBC的发生和进展中是否发挥作用，并追踪恶性细胞与其TME之间的相互作用，研究人员首先评估了E0771细胞（小鼠TNBC细胞系）中的CD84表达情况。为此，研究人员通过实时qPCR确定了E0771细胞中CD84的mRNA表达水平。结果显示，E0771细胞几乎不表达CD84 mRNA，而通过siCD84抑制其表达几乎不会对其已很低的表达水平产生影响。接下来，研究人员确定了E0771细胞中的CD84蛋白水平，并将其与表达高水平CD84的TCL-1细胞（小鼠CLL模型）进行了比较。结果显示，与TCL-1衍生细胞相比，E0771细胞中CD84的表达水平极低。

接下来，为了确定细胞表面CD84在它们体内的ME中的作用，研究人员将E0771细胞注射到野生型或CD84缺乏小鼠体内。在第14和21天时，测量并记录肿瘤体积。在第21天时，分析来自TME的细胞，以确定免疫抑制细胞（包括MDSCs、Bregs、T细胞、CD84和耗竭标记表达）的积累情况。与CD84敲除小鼠相比，WT小鼠的肿瘤明显更大。此外，尽管E0771癌细胞几乎不表达细胞表面CD84，但它们周围的TME中的免疫细胞表达的这种受体水平显著高于脾脏免疫细胞的表达水平，这表明肿瘤细胞触发了其ME中CD84表达的升高。对TME中免疫亚群的详细分析显示，在缺乏CD84的情况下，肿瘤ME中积累的G-MDSC和M-MDSC的百分比和绝对数量以及M-MDSC中诱导型一氧化氮合酶的表达水平降低。另外，WT ME中B细胞产生的Breg的比例和数量较高。最后，在CD84敲除和野生型小鼠的肿瘤ME中检测到相似比例的CD4和CD8 T细胞，但来自CD84缺乏环境的CD8 T细胞显示出降低的耗竭标记表达。由于在健康的CD84敲除小鼠中与健康的野生型小鼠相比没有出现免疫抑制细胞（如Bregs）的稳态丢失，这些结果表明在小鼠中CD84表达与TNBC疾病的严重程度相关。此外，CD84的缺失导致抗肿瘤免疫反应的更高效性和肿瘤生长的抑制。

CD84调节免疫抑制性T细胞、髓系抑制细胞（MDSCs）和调节性B细胞（Bregs）进入肿瘤微环境（TME）

结论

综合研究结果表明，CD84在调节TNBC的免疫抑制中发挥着至关重要的作用。研究人员推测，癌细胞通过CD84支持其微环境中Tregs、MDSCs和Bregs等耐受性免疫细胞的积累。反过来，这些细胞为癌细胞提供了对抗抗肿瘤免疫反应的保护，使它们得以生存和增殖。因此，CD84可作为打破免疫耐受的治疗靶点。在TNBC患者中阻断其活性可能导致抗肿瘤免疫能力的增强，从而抑制肿瘤的进展。